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【qPCR】熒光定量PCR的熔解曲線,你了解多少?
發布時間:2025-04-15
熔解曲線探針法是一種利用特異性探針結合到目標DNA序列上的技術,通過監測探針與目標DNA結合狀態的溫度依賴性變化,來識別和定量特定的DNA或RNA序列。這種方法的關鍵在于探針與目標序列匹配時,其熔解溫度(Tm值)較高;而存在單核苷酸多態性(SNPs)或其他變異時,Tm值會下降。通...
詳情
2022
1-21
雙槽梯度PCR儀應該這樣使用
雙槽梯度PCR儀的反應原理類似于DNA的天然復制過程,其特異性依賴于與靶序列兩端互補的寡核苷酸引物。PCR由變性一退火(復性)--延伸三個基本反應步驟構成:①模板DNA的變性:模板DNA經加熱至94℃左右一定時聚合酶鏈式反應間后,使模板DN...
2022
1-17
熒光定量基因擴增儀使用必須遵守下面的基本安全措施
熒光定量基因擴增儀在操作、維護和修理本儀器的所有階段,都必須遵守下面的基本安全措施。如果不遵守這些措施或本說明書其它地方指出的警告,便可能影響到儀器提供的保護。同時,這也會破壞設計和制造的安全標準以及儀器的預期使用范圍。a)儀器接地為了避免...
2022
1-11
熒光定量PCR的理論依據是什么?
熒光定量PCR在反應中,引入了一種熒光化學物質,隨著PCR反應的進行,PCR反應產物不斷累計,熒光信號強度也等比例增加。每經過一個循環,收集一個熒光強度信號,這樣就可以通過熒光強度變化監測產物量的變化。從而得到一條熒光擴增曲線。熒光擴增曲線...
2022
1-4
二維梯度PCR的應用領域有哪些?
PCR技術從發明至今已有二十多年的時間,用于PCR實驗的儀器不斷的推陳出新。然而PCR的基本過程沒有太大變化,包括變性-退火-延伸這三步。這其中包括反應條件、使用試劑的量甚至是引物等,很多研究者在進行PCR優化時都會考慮退火溫度的優化,這時...
2021
12-27
實時熒光定量PCR儀保養及維護方法
高分辨率溶解(HRM)作為一種聯管式的PCR后分析技術,引起了學術界的廣泛關注。HRM基于DNA雙鏈的溶解特性對PCR產物進行分析,與傳統的溶解曲線分析類似,但提高更多的信息,因而具有更廣泛的應用。可根據PCR產物的序列、長度、GC含量或鏈...
2021
12-18
雙槽二維梯度PCR儀該如何設置合適的退火溫度?
雙槽二維梯度PCR儀就是將多個的PCR反應放在一起做,不用一次一次的作很多次,溫度梯度PCR可以很快的找出適合的退火溫度,或者說可以在適合的退火溫度下擴增出目的條帶。除具標準PCR儀功能外,其梯度模塊還能同時進行多達12個不同退火溫度的PC...
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